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千舍生物開(kāi)工大吉,干細(xì)胞專用,特級(jí)胎牛血清*......

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更新時(shí)間:2023-12-22

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胎牛血清(品牌:sciencell 貨號(hào):0500)

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ScienCell胎牛血清(FBS)是通過(guò)肥牛血清穿刺的方式獲得無(wú)菌血液凝結(jié)后得到,它作為細(xì)胞生長(zhǎng)添加物有廣泛的應(yīng)用,ScienCell的每一批胎牛血清均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)控和測(cè)試。FBS經(jīng)無(wú)菌過(guò)濾,PH值在7左右,且符合內(nèi)素素標(biāo)準(zhǔn),經(jīng)過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)測(cè)試,培養(yǎng)基內(nèi)毒素不超過(guò)0.625EU/ml,且無(wú)病毒成分,是您培養(yǎng)細(xì)胞的*選擇。

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干細(xì)胞是一種能夠長(zhǎng)期存活,且具有不斷自我繁殖能力和多向化潛能,幾乎存在于所有組織中的原始細(xì)胞。近年來(lái)隨著科學(xué)家們研究的深入,干細(xì)胞在血液系統(tǒng)疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、心血管疾病、自身免疫系統(tǒng)疾病以及內(nèi)分泌疾病等各種疾病的治療上讓人們看到了希望。

胎牛血清的正確存放與解凍是各位實(shí)驗(yàn)家尤為關(guān)注的一個(gè)問(wèn)題,經(jīng)過(guò)專業(yè)人員從其成分中分析,在保證質(zhì)量的前提下,胎牛血清的正確存放與解凍的方法,總結(jié)如下:

1)保存血清好的方法?

我們建議血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃。然而,若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。若您一次無(wú)法用完一瓶,建議您無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。

2)如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?

我們建議您將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。

3)血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理?

血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會(huì)存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但少量這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。

若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi),以400g 稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾。我們不建議您以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞您的過(guò)濾膜。

4)為什么要熱滅活血清?

加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究,培養(yǎng)ES 細(xì)胞,昆蟲(chóng)細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí),推薦使用熱滅活血清。

5)有必要做熱滅活嗎?

實(shí)驗(yàn)顯示,經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清,對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過(guò)的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn),或*沒(méi)有任何作用,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點(diǎn)",常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會(huì)使此沉淀物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。因此我們建議您,若非必須,您可以不需要做熱處理這一步。如此一來(lái),不但節(jié)省您寶貴的時(shí)間,更確保血清的質(zhì)量!

6)為什么儲(chǔ)存在冰箱中的胎牛血清會(huì)出現(xiàn)少量沉淀?

胎牛血清沒(méi)有預(yù)老化,儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁。這應(yīng)該不會(huì)影響血清的質(zhì)量。推薦在-20℃儲(chǔ)存胎牛血清,避免反復(fù)凍融。

7)如何避免沉淀物的產(chǎn)生?

我們建議您在使用血清的時(shí)候,注意下列的操作:

解凍血清時(shí)請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。解凍血清時(shí)請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。

胎牛血清(品牌:sciencell 貨號(hào):0500)

產(chǎn)品特點(diǎn)

三次0.1um無(wú)菌過(guò)濾

支原體檢測(cè)和病毒篩查

干冰運(yùn)輸,建議存儲(chǔ)溫度為-20℃至-10℃

大客戶申請(qǐng)可提供試用裝

問(wèn):原代細(xì)胞和細(xì)胞系有什么區(qū)別?

答:原代細(xì)胞是直接從組織中分離出來(lái)的,原代細(xì)胞一經(jīng)培養(yǎng)使用壽命是有限的。利用原代細(xì)胞是因?yàn)樗A袅嗽S多在體內(nèi)時(shí)的標(biāo)志。細(xì)胞系是可以持續(xù)生長(zhǎng)和復(fù)制的細(xì)胞群,它經(jīng)歷了遺傳轉(zhuǎn)化有無(wú)限增殖的潛能。為了醫(yī)藥和科研目的,細(xì)胞系已經(jīng)在體外維持培養(yǎng)。連續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞系隨著代數(shù)的增加細(xì)胞的基因型和表型都有可能發(fā)生改變。一般細(xì)胞系缺少細(xì)胞在體內(nèi)的標(biāo)志,也表現(xiàn)出與原代細(xì)胞不同的標(biāo)志。

問(wèn):ScienCell如何確定細(xì)胞類型?

答:細(xì)胞類型以多種方式確認(rèn)。細(xì)胞形態(tài)是非常重要的,可以幫助我們確定正確的細(xì)胞。此外,我們的質(zhì)量控制部門使用免疫熒光確認(rèn)特定細(xì)胞類型出現(xiàn)的標(biāo)志。免疫熒光法也可以用來(lái)識(shí)別污染的細(xì)胞。

問(wèn):我能獲得哪些細(xì)胞供體的信息?

答:我們保留所有人和動(dòng)物原代細(xì)胞的記錄,如果您有特殊需要(年齡或性別)請(qǐng)?jiān)谟嗁?gòu)前聯(lián)系客服部詢問(wèn)。

問(wèn):我們是否為細(xì)胞做人類白細(xì)胞抗原分型?

答:人類白細(xì)胞抗原(HLA)分型是鑒定一個(gè)人的組織與另一個(gè)人的組織的近似度的方法。我們目前不在ScienCell研究實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行測(cè)試。

問(wèn):我的原代細(xì)胞會(huì)是100%純嗎?

答:原代細(xì)胞永遠(yuǎn)不會(huì)100%純,不過(guò)我們會(huì)盡可能的獲得純細(xì)胞,總會(huì)有污染細(xì)胞的。

問(wèn):有多少經(jīng)驗(yàn)才能開(kāi)始正常原代細(xì)胞培養(yǎng)?

答:推薦有經(jīng)驗(yàn)者在無(wú)菌環(huán)境下用層流凈化罩工作,如果有其它類型細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)的話也是很有利的.如果你是細(xì)胞培養(yǎng)的初學(xué)者或打算建立細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室,我們會(huì)為你提供幫助.請(qǐng)聯(lián)系我們的細(xì)胞培養(yǎng)專家.

問(wèn):接收到的凍存細(xì)胞該如何處理?

答:收到包裝箱后,立即將凍存細(xì)胞從干冰移入液氮中凍存.此過(guò)程盡量快以避免升溫.不要將細(xì)胞儲(chǔ)存在-20℃或-80,這樣會(huì)對(duì)細(xì)胞造成不可挽回的傷害.

問(wèn):當(dāng)我第一次復(fù)蘇正常人類細(xì)胞時(shí)需要離心細(xì)胞去除二甲基亞楓嗎?

答:我們不推薦離心去除二甲基亞楓。離心過(guò)程比殘留二甲基亞楓對(duì)細(xì)胞的傷害更大,尤其是不正當(dāng)?shù)母咚匐x心.在你復(fù)蘇細(xì)胞的時(shí)候二甲基亞砜會(huì)被培養(yǎng)液充分的稀釋。比如你將整管1ml細(xì)胞放入已加入15ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中,二甲基亞楓的濃度將小于0.67,如果細(xì)胞的接種密度為每平方厘米5000-10000,二甲基亞楓的濃度會(huì)更低.

問(wèn):凍存的細(xì)胞該如何開(kāi)始培養(yǎng)?

答:注意:請(qǐng)?jiān)敿?xì)步驟請(qǐng)參閱細(xì)胞產(chǎn)品說(shuō)明書

⑴將一管細(xì)胞從液氮罐中取出,注意保護(hù)手和眼睛.

⑵用10秒鐘時(shí)間將小管的蓋子擰松1/4以去除殘留在螺紋處的液氮,然后將蓋子蓋緊.

⑶將小管放入37℃水浴中,輕輕握住并旋轉(zhuǎn),直到管內(nèi)物體*融化.

⑷將小管立即從水浴中拿出,擦干,轉(zhuǎn)入無(wú)菌環(huán)境.

⑸用70%的酒精沖洗小管,然后擦去多余酒精.

⑹打開(kāi)蓋子,注意手指不要碰到里面的螺紋.1ml離心管離心內(nèi)容物.

⑺平衡管內(nèi)物,用多聚賴氨酸包被培養(yǎng)瓶(多數(shù)細(xì)胞用T-75的培養(yǎng)瓶).多數(shù)細(xì)胞類型推薦接種密度為每平方厘米5000細(xì)胞.

⑻蓋好蓋子,輕輕搖晃培養(yǎng)瓶以使細(xì)胞分布均勻.若需要?dú)怏w交換可打開(kāi)蓋子.

⑼將培養(yǎng)瓶放放培養(yǎng)箱中(37,5%CO2,95%空氣)

⑽植入培養(yǎng)后第6-16小時(shí)更換一次培養(yǎng)基以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細(xì)胞.

問(wèn):培養(yǎng)瓶中應(yīng)該加入多少體積的培養(yǎng)基?

答:推薦用量:T-25培養(yǎng)瓶5ml,T-75培養(yǎng)瓶15ml,T-150培養(yǎng)瓶30ml.

問(wèn):多久更換一次培養(yǎng)基?

答:請(qǐng)查看您培養(yǎng)細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書。一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,

注意:第一次植入凍存的細(xì)胞后,6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞.

問(wèn):匯合度達(dá)到多少我應(yīng)該傳代?

答:這取決于細(xì)胞類型。比如,內(nèi)皮細(xì)胞不應(yīng)該讓細(xì)胞匯合度達(dá)到90%-100%,因?yàn)槟菢訒?huì)助長(zhǎng)污染細(xì)胞,并使內(nèi)皮細(xì)胞老化。成纖維細(xì)胞達(dá)到90%-98%也不會(huì)有什么不利的影響。一般原代細(xì)胞不宜長(zhǎng)得過(guò)滿,因?yàn)闀?huì)使細(xì)胞老化并助長(zhǎng)污染細(xì)胞。

問(wèn):原代細(xì)胞推薦的傳代比例是多少?

答:ScienCell 公司不對(duì)正常細(xì)胞做傳代比例的建議,,因?yàn)樵谟靡让柑幚砗蠹?xì)胞的量會(huì)有所變化。我們建議胰酶處理后對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù),按照該細(xì)胞的說(shuō)明書上建議的接種濃度進(jìn)行接種。

問(wèn):倍增和代數(shù)有什么區(qū)別?

答:倍增是培養(yǎng)物中細(xì)胞總數(shù)加倍,通常是指細(xì)胞指數(shù)或?qū)?shù)生長(zhǎng)期.代數(shù)是指細(xì)胞群從培養(yǎng)瓶中移出,傳代培養(yǎng)過(guò)程的次數(shù),傳代培養(yǎng)的目的是使細(xì)胞處于低密度以刺激其進(jìn)一步生長(zhǎng).

問(wèn):正常人類細(xì)胞能傳多少代?

答:ScienCell不使用代數(shù)描述細(xì)胞的生長(zhǎng)潛能,因?yàn)槊恳晃豢蛻粲貌煌膫鞔壤?/span>.ScienCell研究室會(huì)在細(xì)胞產(chǎn)品說(shuō)明書中標(biāo)注倍增次數(shù)。

問(wèn):非增殖細(xì)胞能傳代培養(yǎng)嗎?

答:非增殖細(xì)胞不能進(jìn)行傳代培養(yǎng),因?yàn)樗麄儾荒茉鲋?。非增殖?xì)胞包括:神經(jīng)元,小膠質(zhì)細(xì)胞,巨噬細(xì)胞和其他一些細(xì)胞類型。如果細(xì)胞是非增殖細(xì)胞產(chǎn)品說(shuō)明書中會(huì)注明。

問(wèn):我能凍存ScienCell的正常原代細(xì)胞嗎?

答:我們不建議客戶凍存ScienCell的人和動(dòng)物的原代細(xì)胞。

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淡黃色,透明——2小時(shí)以內(nèi)的國(guó)產(chǎn)新生牛血清,膽紅素含量較少;

金黃色,透明——產(chǎn)下較長(zhǎng)時(shí)間的新生牛血清,一般超過(guò)2小時(shí)了;

金黃色,不透明——產(chǎn)下幾天或更久的小牛血清;

淡黃色,帶一點(diǎn)微紅,透明——等級(jí)最高的進(jìn)口胎牛血清,如特級(jí)的北美;

淡紅色,透明——普通的進(jìn)口胎牛血清;

紅色偏深,透明——普通的進(jìn)口胎牛血清,南美的居多,采血環(huán)節(jié)不夠嚴(yán)謹(jǐn);

紅色偏暗,透明——普通胎牛血清,保存不好,血紅蛋白氧化了;

紅色,不透明——進(jìn)口小牛血清,透明度越差,牛齡越大。






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